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一個(gè)好的ATCC細(xì)胞株有多方面要求

原載自:www.linai8768.com[行情動(dòng)態(tài)]  2017-09-07  瀏覽次數(shù):1764

   ATCC細(xì)胞株是用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法,由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群。ATCC細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個(gè)培養(yǎng)期間始終存在。原代培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后即為細(xì)胞系(cell line), 由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細(xì)胞世系所組成。如果不能繼續(xù)傳代,或傳代次數(shù)有限, 可稱為有限細(xì)胞系(finite cell line), 如可以連續(xù)培養(yǎng), 則稱為連續(xù)細(xì)胞系(continuous cell line), 培養(yǎng)50代以上并無限培養(yǎng)下去。 所以ATCC細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志的培養(yǎng)細(xì)胞。從培養(yǎng)代數(shù)來講,可培養(yǎng)到40-50代。ATCC細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個(gè)培養(yǎng)期間始終存在。對于人類腫瘤細(xì)胞,在體外培養(yǎng)半年以上,生長穩(wěn)定,并連續(xù)傳代的即可稱為連續(xù)性株或系。
  購買國外ATCC細(xì)胞株需要考慮的因素有如下幾點(diǎn):
  1、ATCC細(xì)胞株的生物等級,由于有些ATCC細(xì)胞株及菌株屬于管制品,所以從國外購貨比較麻煩。
  2、在購買國外ATCC細(xì)胞株時(shí),需交待國外加比較多的干冰(一般在13公斤以上),采用比較密封的泡沫盒加套紙箱。
  3、報(bào)關(guān)時(shí)盡量提供比較充足的證明材料,以免擔(dān)擱時(shí)間而導(dǎo)致干冰揮發(fā)完ATCC細(xì)胞株死亡,甚至于被退回給發(fā)貨人。
  4、如果通過國外ATCC細(xì)胞株在國內(nèi)的代理商購買的話,合同中需注明以下一些內(nèi)容:
  a.明確的到貨時(shí)間,這個(gè)時(shí)間需注明的是工作日,還是普通日。
  b.采用什么樣的運(yùn)輸方法?
  c.如果屬于技術(shù)外的因素而ATCC細(xì)胞株無法培養(yǎng)活,供方需負(fù)什么樣的責(zé)任?
  d.ATCC細(xì)胞株的詳細(xì)資料,以及ATCC細(xì)胞株的代數(shù),其中,ATCC的ATCC細(xì)胞株一般都在幾十代,這個(gè)需要與國外確認(rèn),IST-Banca可與他們的代理商索取詳細(xì)資料。
  e.需在合同中注明*,避免相關(guān)公司魚龍渾雜,從國外購買回一株ATCC細(xì)胞株,經(jīng)過培養(yǎng)傳代后,同時(shí)供應(yīng)給幾個(gè)人;一般國外進(jìn)口的ATCC細(xì)胞株都會(huì)有原裝的凍存管,而且每一支凍存管上都會(huì)有批號(hào),而且每次的批號(hào)都不一樣。
  f.在決定購買ATCC細(xì)胞株之前,必須仔細(xì)閱讀他們的培養(yǎng)信息,所謂“ATCC細(xì)胞株未到,培養(yǎng)基先行一步”。
  g.在接到ATCC細(xì)胞株后,要求供應(yīng)公司的人員現(xiàn)場參與,從而用于確認(rèn)責(zé)任。
  h.在培養(yǎng)前,請確認(rèn)您的二氧化碳培養(yǎng)箱二氧化碳濃度的準(zhǔn)確性,國外的ATCC細(xì)胞株建議用進(jìn)口的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,比如:Fisher,corning,falcon品牌的培養(yǎng)瓶。
  i.詢問你的代理商或者經(jīng)銷商,接到ATCC細(xì)胞株后是否需要離心置換出DMSO,因?yàn)橛行┘?xì)胞廠家建議不要離心,他們會(huì)認(rèn)為離心而導(dǎo)致的碎片比DMSO產(chǎn)生毒性的害處更大,如果可以離心,轉(zhuǎn)速不要過高,一般都在1000轉(zhuǎn)以下,此處需要注意,因?yàn)橛械墓緯?huì)拿這一點(diǎn)來拒絕索賠。
  j.培養(yǎng)基的服務(wù),仔細(xì)與供應(yīng)商確認(rèn)培養(yǎng)基的品牌及份量,以免供應(yīng)商以些理由來推翻你索賠的理由。
  k.在ATCC細(xì)胞株復(fù)蘇時(shí),一定要先想好步驟再做,一步一步來做,避免導(dǎo)致操作中的污染,復(fù)蘇是一個(gè)非常重要的步驟,往往容易導(dǎo)致污染,然后為污染所導(dǎo)致的雜質(zhì)而傷透腦筋。
  一個(gè)好的ATCC細(xì)胞株有多方面要求:
  1. 產(chǎn)量高,高的產(chǎn)量直接降低固定投資和單次生產(chǎn)成本。
  2. 產(chǎn)品質(zhì)量符合要求。產(chǎn)品質(zhì)量影響藥效和安全性。
  3. 穩(wěn)定性。產(chǎn)量和質(zhì)量在生產(chǎn)傳代過程中不應(yīng)有大的改變。一般認(rèn)為在60-90PDL產(chǎn)量變化不超過30%是可以接受的。
  4. 與生產(chǎn)過程的相容性。ATCC細(xì)胞株需要適合大規(guī)模生產(chǎn)放大。
  5. 合規(guī)。ATCC細(xì)胞株的構(gòu)建過程應(yīng)避免接觸或使用動(dòng)物來源成分或其它可能影響安全性的成分,保證單克隆性(clonality)以及整個(gè)過程的實(shí)驗(yàn)記錄完整。

 

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